uiuibg

Ko te tātaritanga hononga-a-iwi mo te kaha o te urupare a te MAMP-elicited defence me te atete ki te whai waahi rau i roto i te sorghum

Nga tipu me nga taonga tukumate

He taupori mapi sorghum e mohiotia ana ko te taupori hurihuri sorghum (SCP) na Takuta Pat Brown i te Whare Wananga o Illinois (kei UC Davis inaianei). Kua korerohia i mua ake nei, he kohinga o nga rarangi kanorau kua hurihia ki te photoperiod-insensitivity me te iti ake o te ahua ki te whakahaere i te tipu me te whakawhanaketanga o nga tipu ki nga taiao US. 510 nga rarangi mai i tenei taupori i whakamahia i roto i tenei rangahau ahakoa na te kino o te whakatipu me etahi atu take whakahaere kounga, kaore i whakamahia nga rarangi katoa ki te tātari i nga ahuatanga e toru. I te mutunga ka whakamahia nga raraunga mai i nga rarangi 345 mo te tātaritanga o te urupare chitin, 472 rarangi mo te whakautu flg22, me te 456 mo te aukati TLS.B. kukiI whiwhihia te riaka LSLP18 mai i a Dr. Burt Bluhm i te Whare Wananga o Arkansas.

Inenga whakautu MAMP

E rua nga MAMP rereke i whakamahia i roto i tenei rangahau flg22, (Genscript catalog # RP19986), me te chitin. I whakatipuhia nga tipu Sorghum ki roto i nga whakaurunga kua whakatakotoria ki runga i nga papa kua whakakiia ki te oneone (33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) i roto i te kati kōtuhi. I whakamakukuhia nga tipu i te ra i mua i te kohinga tauira kia kore ai te makuku rau i te ra o te kohinga.

I matapōkeretia ngā rārangi, ā, mō ngā take arorau, i whakatōngia kia 60 ngā rārangi. Mo ia raina, e toru nga 'pota' i whakato kia rua nga kakano mo ia rarangi. I whakatōhia nga kohinga o muri mai i te wa i tukatukahia ai te roopu o mua tae noa ki te aromatawai i te katoa o te taupori. E rua nga oma whakamatautau i whakahaeretia mo nga MAMP e rua me nga momo momo ira i whakararangitia i ia o nga oma e rua.

I mahia nga whakamatautau ROS pera i nga korero o mua. He poto, mo ia raina, e ono nga kakano i whakato ki roto i nga kohua rereke e 3. Mai i nga tipu ka puta, e toru i tohua i runga i te riterite. Ko nga tipu he ahua rereke, he nui ake ranei, he poto ake ranei i te nuinga kaore i whakamahia. E wha nga rau kopae e 3 mm te diameter i tangohia mai i te waahanga whanui o te rau tuawha o nga tipu sorghum rereke e 15-ra te pakeke. Kotahi te kōpae mo ia rau mai i nga tipu e rua me nga kōpae e rua mai i te tipu kotahi, ko te kōpae tuarua ka noho hei mana wai (tirohia ki raro). Ka rewa takitahi nga kopae ki runga i te 50 µl H20 i roto i te pereti 96-puna pango, ka hiritia ki te hiri konumohe kia kore ai e pa ki te marama, ka pupuri i te pāmahana rūma mo te po. I te ata i muri mai ka mahia he otinga tauhohenga ma te whakamahi i te 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako, catalog # 120-04891), 2 mg/ml horseradish peroxidase (Momo VI-A, Sigma-Aldrich, catalog # P6782), me te 100 mg/ml Chitin or 2 μM ranei. 50 µl o tenei wairewa tauhohenga i tapirihia ki te toru o nga puna e wha. Ko te puna tuawha he mana whakahi, i tapirihia te otinga tauhohenga haunga te MAMP. E wha nga puna patea he wai anake i whakaurua ki ia pereti.

I muri i te taapiri i te otinga tauhohenga, ka inehia te whakamarama ma te whakamahi i te SynergyTM 2 te kaipanui microplate rapu-maha (BioTek) ia 2 meneti mo te 1 haora. Ka mahia e te kaipanui pereti nga inenga whakamarama ia 2 meneti i roto i tenei 1 haora. Ko te tapeke o nga panui 31 katoa i tatauhia hei whakaatu i te uara mo ia puna. Ko te uara tata mo te whakautu MAMP mo ia momo momo i tatauhia hei (te uara maramara toharite o nga puna whakamatautau e toru—te uara poka tawai) -whakahekea te uara poka noa. I tata tonu nga uara puna patea ki te kore.

Kopae rau oNicotiana benthamiana, kotahi te raina sorghum whakautu teitei (SC0003), me tetahi raina sorghum whakautu iti (PI 6069) i whakauruhia ano hei mana whakahaere i ia pereti 96-puna mo nga kaupapa whakahaere kounga.

B. kukite whakarite inoculum me te werohanga

B. kukii whakaritea te inoculum pera i korero i mua. I te wa poto, ka rukuhia nga karepe sorghum ki te wai mo nga ra e toru, ka horoia, ka kohia ki roto ki nga ipu koeko 1L me te autoclave mo te haora i te 15psi me te 121 °C. Ka werohia nga karepe ki te 5 ml o te mycelia macerated mai i te ahurea hou o teB. kukiKa wehea te LSLP18 ka waiho mo te 2 wiki i te pāmahana rūma, ka ruia nga ipu ia 3 ra. I muri i nga wiki e 2, ka whakamarokehia nga kakano sorghum kua pangia e te harore, katahi ka rongoa ki te 4 °C tae noa ki te werohanga mara. Ko taua inoculum i whakamahia mo te katoa o te whakamatautau me te hanga hou ia tau. Mo te werohanga, 6-10 nga kakano kua pangia ki roto i te riu o nga tipu 4-5 wiki te pakeke. Ko nga pua i puta mai i enei harore ka timata te mate ki nga tipu sorghum i roto i te wiki.

Te whakarite purapura

I mua i te whakatō i te kākano sorghum i tukuna ki te kakano sorghum, te ngarara, me te ranunga whakamarumaru kei roto ~ 1% Spirato 480 FS fungicide, 4% Sebring 480 FS fungicide, 3% Sorpro 940 ES te tiaki purapura. Katahi ka whakamarokehia nga kakano mo nga ra e 3, he paninga angiangi o tenei ranunga huri noa i nga kakano. I whakaaetia e te kaipupuri haumaru te whakamahi i te waipiro Dual Magnum hei maimoatanga i mua i te putanga.

Aromātai i te ātetetanga o te Wāhi Rau Target

I whakatōngia te SCP ki te Teihana Rangahau Huawhenua Central i Clayton, NC i te Pipiri 14–15 2017 me Hune 20, 2018 i roto i te hoahoa poraka oti matapōkere me nga tukuruatanga e rua i ia keehi. I whakatohia nga whakamatautau ki nga rarangi kotahi 1.8 m me te whanui rarangi 0.9 m ma te whakamahi i nga kakano 10 mo ia papa. E rua nga rarangi taitapa i whakatōngia huri noa i te taha o ia whakamatautau hei aukati i nga paanga o te taha. I werohia nga whakamatautau i te Hūrae 20, 2017 me te 20 o Hurae, 2018 i te wa e tipu ana nga tipu sorghum 3. I mauhia nga whakatau i runga i te kotahi ki te iwa nga pauna, i reira nga tipu kaore he tohu o te mate i tohuhia i te mea he iwa nga tipu kua mate katoa i tohua hei kotahi. E rua nga whakatau i tangohia i te tau 2017 me nga panui e wha i te tau 2018 ka timata i nga wiki e rua i muri i te werohanga ia tau. Ko te sAUDPC (waahanga kua whakaritea i raro i te arai ahu whakamua o te mate) i tatauhia pera i te korero o mua.


Wā tuku: Apr-01-2021